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液相色譜柱的裝柱方法

   液相色譜柱的一些要求
  zui常用的色譜柱填充劑為化學鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑,以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為常用,辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠(如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等)也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑,常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑;分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑;對映異構體的分離通常使用手性填充劑。
  填充劑的性能(如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團的表面覆蓋度、含碳量和鍵合類型等)以及色譜柱的填充,直接影響供試品的保留行為和分離效果??讖皆?5nm(1nm=10Å)以下的填料適合于分析分子量小于2000 的化合物,分子量大于2000 的化合物則應選擇孔徑在30nm 以上的填料。除另有規(guī)定外,分析柱的填充劑粒徑一般在3μm~10μm 之間。粒徑更小(約2μm)的填充劑常用于填裝微徑柱(內(nèi)徑約2mm),使用微徑柱時,輸液泵的性能、進樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配;如有必要,色譜條件也需作適當?shù)恼{整。當對其測定結果產(chǎn)生爭議時,應以品種正文規(guī)定的色譜條件的測定結果為準。 存放前除去雜質和鹽,采用合適的存放溶劑,避免色譜柱床的干枯,避免機械振動,防止細菌生長,注意存放的溫度。
  液相色譜柱的裝柱方法
  1. 色譜柱應該是可以直接接在勻漿罐上的,如果不能,則需要一個轉換接頭。這個轉換接頭的尺寸很重要,既要能防止漏液,又要避免過硬或尺寸不合適而導致色譜柱接口螺紋的損壞;
  2. 具體裝柱過程一般來說是①先以合適的勻漿液(多為有機溶劑,劉國詮老師的《色譜柱技術》一書中列的比較全,可供參考)將填料充分分散(可以借助攪拌、超聲等方式);②在填料勻漿的過程中,完成準備工作,即把色譜柱接在勻漿罐的下端(色譜柱不接勻漿罐的一段要接好篩板和柱頭,確保擰緊但不能擰死以免損壞色譜柱),打開勻漿罐上端和氣泵之間的接頭以便灌入勻漿液;③勻漿液罐好后,接好勻漿罐上端接頭,開始加壓;④選擇合適的壓力,就可以把填料壓實了;⑤穩(wěn)定在適當?shù)膲毫ι蠅阂欢〞r間后,卸掉壓力,卸下色譜柱,把接勻漿罐這一段的填料抹平,裝上篩板和柱頭即可使用。
  3. 裝柱是個困難的過程,需要耐心摸索壓力、勻漿液體積等參數(shù),才能確保柱床均勻密實,達到*柱效和峰形。如果裝的不好,則可能出現(xiàn)柱效不夠,或拖尾等問題。
         液相色譜柱的裝柱方法一般情況下都是這樣操作的,特殊情況請廠家或者代理商。
 
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